酵母表達系統(tǒng)包括釀酒酵母表達系統(tǒng)，甲醇酵母表達系統(tǒng)以及其他酵母表達系統(tǒng)。畢赤酵母屬于甲醇營養(yǎng)型酵母，能夠?qū)⒓状甲鳛槲ㄒ惶荚?。畢赤酵母表達系統(tǒng)的優(yōu)勢如下所述：

①擁有目前最強，調(diào)控機理最嚴格的啟動子之一醇氧化酶基因AOX1啟動子，非常利于外源基因的表達調(diào)控；

②具有翻譯后的蛋白加工修飾功能例如磷酸化、糖基化等，是一種不可多得的集聚多種優(yōu)勢的真核表達系統(tǒng)；

③ 既可以在細胞內(nèi)表達，也可在細胞外表達；

④培養(yǎng)基成本低廉，培養(yǎng)條件簡單，生長繁殖速度迅速；

⑤外源基因可以單拷貝或者多拷貝的形式在特定的位點整合進酵母染色體上，伴隨著染色體的復制而復制，有較高的遺傳穩(wěn)定性，同釀酒酵母一樣以穩(wěn)定的表達菌株存在；

⑥可以進行大規(guī)模發(fā)酵，適合高密度培養(yǎng)，非常適合重組真核蛋白的工業(yè)放大化生產(chǎn)制備。

畢赤酵母宿主菌常用的菌株類型有四種，分別是X33、GS115、KM71H、SMD1163/8。其中X33是野生型菌株，而GS115和KM71H兩種，都具有His4營養(yǎng)缺陷標記。GS115?菌株具有AOX1基因，屬于Mut⁺，指的是甲醇利用正常型；KM71 H菌株的AOX1位點被ARG4基因插入，屬于Mut^s，指甲醇利用緩慢型，兩種菌株都適用于一般的酵母轉(zhuǎn)化方法。SMD116（his4 pep4）屬于蛋白酶缺失型菌株，它能夠表達一些由于蛋白降解而引起的的表達產(chǎn)物分布不均的問題。只是由于SMD116（his4 pep4）菌株生長緩慢，導致表達的外源蛋白質(zhì)產(chǎn)量低。

服務(wù)內(nèi)容：
1、亞克?。簛喛寺≈羶蓚€適當?shù)谋磉_載體中，制備大量質(zhì)粒，構(gòu)建線性化載體。
2、表達條件優(yōu)化及評估：將線性載體轉(zhuǎn)化至適合的寄主菌株中，通過PCR方法確定陽性轉(zhuǎn)化株，表達條件優(yōu)化及確認–確定培養(yǎng)基及誘導濃度，SDS-PAGE以及Western blot分析。
3、蛋白表達及純化：少量表達，純度達90%以上。
服務(wù)價格及周期：

服務(wù)編號	服務(wù)項目	服務(wù)周期
S2002-1	畢赤酵母表達載體的構(gòu)建（參見基因克隆部分）	2-3周
S2002-2	畢赤酵母表達載體轉(zhuǎn)化到宿主菌	2-4周
S2002-3	蛋白表達條件的優(yōu)化	2-3周
S2002-4	蛋白表達及純化（85%純度的蛋白200ug）	2-3周

載體選擇：

編號	載體名稱	載體抗性	表達菌	表達類型
BCJM-001	pPICzaA	博來霉素	GS115/X33等	誘導表達
BCJM-002	pPICzA	博來霉素	GS115/X33等	誘導表達
BCJM-003	其他	–	–	–

服務(wù)承諾：
1、基因合成和載體構(gòu)建參見相關(guān)服務(wù)部分。
2、本公司會在最短的時間內(nèi)快速完成實驗，并為客戶提供足量蛋白以滿足科研需求。
3、提供完整的實驗報告。
4、提供合乎客戶要求量和純度的特定蛋白。