枯草芽孢桿菌表達系統(tǒng)與其他表達系統(tǒng)相比,優(yōu)勢在于表達宿主本身的非致病性;表達的蛋白不混有內(nèi)毒素;沒有密碼子偏愛性可以改為沒有明顯的偏愛密碼子;并且擁有一套高效的分泌信號肽及分子伴侶系統(tǒng),而且在多數(shù)情況下,芽孢桿菌分泌的真核來源的重組蛋白具有天然構(gòu)象和生物活性,避免形成包涵體;表達周期短,蛋白產(chǎn)率高。
目前用芽孢桿菌系統(tǒng)成功表達的真核基因產(chǎn)物有白介素-3(IL-3)、乙肝核心抗原、乙肝PreS2抗原、丙肝病毒殼蛋白、HIV p4Ispf-1蛋白等;成功表達的原核基因產(chǎn)物有甘油-3-磷酸脫氫酶、甘油激酶、纖維素酶、色氨酸合成酶等。
本公司可以根據(jù)客戶需求進行載體改造和宿主菌改造,或者采用商業(yè)化的載體(pHT43載體,配套菌WB800或WB800N),可以提供胞內(nèi)或胞外、組成型或誘導(dǎo)型的表達;可以提供GST、His、HA,F(xiàn)lag、myc、MBP等標簽。
服務(wù)內(nèi)容:
1、亞克?。簛喛寺≈羶蓚€適當?shù)谋磉_載體中,制備大量質(zhì)粒,構(gòu)建線性化載體。
2、表達條件優(yōu)化及評估:將線性載體轉(zhuǎn)化至適合的寄主菌株中,通過PCR方法確定陽性轉(zhuǎn)化株,表達條件優(yōu)化及確認——確定培養(yǎng)基及誘導(dǎo)濃度,SDS-PAGE以及Western blot分析。
3、蛋白表達及純化:少量表達,純度達90%以上。
服務(wù)價格及周期:
服務(wù)編號 | 服務(wù)項目 | 服務(wù)周期 |
S2002-1 | 蛋白枯草芽孢表達載體的構(gòu)建(參見基因克隆部分) | 2-3周 |
S2002-2 | 蛋白枯草芽孢桿菌表達載體轉(zhuǎn)化到宿主菌 | 2-4周 |
S2002-3 | 蛋白表達條件的優(yōu)化 | 2-3周 |
S2002-4 | 蛋白表達及純化(85%純度的蛋白200ug ) | 1周 |
載體選擇:
編號 | 載體名稱 | 載體抗性 | 表達菌 | 表達類型 |
1 | pWB980-ori | 卡那 | WB600 | 組成型表達 |
2 | pP43NMK | 氨卞 | BS168/WB800等 | 組成型表達 |
3 | pHT43 | 氨卞/氯霉素 | BS168/WB800等 | 誘導(dǎo)表達 |
4 | 其他 | – | – | – |
服務(wù)承諾:
1、基因合成和載體構(gòu)建參見相關(guān)服務(wù)部分。
2、本公司會在最短的時間內(nèi)快速完成實驗,并為客戶提供足量蛋白以滿足科研需求。
3、提供完整的實驗報告。
4、提供合乎客戶要求量和純度的特定蛋白。